小鼠结肠癌细胞MC38特性  

1）来源：结肠癌  

2）形态：上皮细胞样  

3）含量：>1x106个/mL  

4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性  

5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装  

运输和保存：使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。  

小鼠结肠癌细胞MC38用途：仅供科研使用。  

细胞培养步骤  

一．培养基及培养冻存条件准备：  

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022,添加NaHCO31.5g/L,D-葡萄糖2.5g/L,丙酮酸钠0.11g/L)，80%；优质胎牛血清，20%。  

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。  

3）冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。  

二．MC38小鼠结肠癌细胞/STR鉴定/镜像绮点（iCell）处理：  

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。  

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。  

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：  

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。  

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。  

3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。  

4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。  

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

https://www.chem17.com/st359713/erlist_2118837.html 

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