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重组蛋白纯化的工艺创新方向

2026-01-29 10:260

  重组蛋白纯化的工艺创新方向:

  1.连续流纯化技术

  原理:将传统层析步骤整合为连续流动系*,减少操作时间和蛋白损失。

  案例:

  多柱层析串联:亲和层析→离子交换→疏水层析连续处理,避免中间样品反复冻融。

  微流控芯片层析:利用微流体技术实现快速、低样品消耗的纯化。

  2.单克隆抗体(mAb)纯化创新

  ProteinA亲和层析优化:

  开*耐碱性洗涤缓冲液(如pH12~13),减少洗脱杂质。

  采用纳米抗体或人工支架抗体(如Fc融合蛋白)提高吸附效率。

  多模式层析(Mixed-ModeChromatography):

  结合离子交换和疏水作用(如CAPTO珠),一步去除多种杂质。

  3.重组蛋白纯化膜分离技术

  切向流过滤(TFF):

  用于浓缩和换液,替代传统超滤,减少蛋白聚集。

  结合深层过滤(如除病毒过滤)去除病毒和微粒。

  膜层析(MembraneChromatography):

  利用功能性膜材料(如离子交换膜)直接吸附杂质,简化操作。

  4.新型标签与捕获技术

  自剪切标签:

  如intein介导的自剪切标签(如CBD-intein),纯化后无需蛋白酶切割。

  非色谱依赖技术:

  热泳动(Thermophoresis):利用温度梯度分离蛋白与杂质。

  等电点沉淀:通过调节pH使杂质沉淀,保留目标蛋白。

  5.人工智能驱动工艺优化

  数据驱动设计:

  利用机器学习预测层析参数(如pH、盐浓度)对杂质去除的影响。

  优化缓冲液配方,减少离子强度或添加剂(如チャァ」剤)的使用。

  在线监测技术:

  实时监测紫外吸收(A280)、荧光或拉曼光谱,动态调整纯化条件。

  http://www.cell-regen.com/

  https://www.chem17.com/st389747/product_36984771.html


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